二手LC高效液相色谱仪分析中  ，通过向流动相中加入改性剂调节pH值和调节流动相的溶剂极性强度  ，可以改善分离的选择性 。
一、向二手LC高效液相色谱仪流动相中加入改性剂调节pH值：
1、抑制溶质离子化：
反相液相色谱中  ，常向含水流动相中加入酸、碱或缓冲溶液  ，使流动相的pH值控制在一定数值  ，抑制溶质离子化  ，减少谱带拖尾  ，改善峰形  ，以提高分离选择性 。例如在分析有机弱酸时  ，常向甲醇－水流动相中加入1%甲酸（或乙酸、三氯乙酸、磷酸、硫酸）  ，抑制溶质离子化  ，以获得对称的色谱峰 。对于弱碱性样品向流动相中加入1%三乙胺  ，也可以达到同样的效果 。
2、调节离子强度：
反相液相色谱中  ，当被分析物质是易离解的有机物时  ，随流动相pH值的增加  ，键合相表面残存的硅羟基和碱的阴离子的亲和能力增强  ，会引起峰形拖尾并干扰分离  ，可在流动性中加入0.1%～1%的乙酸盐、硫酸盐或硼酸盐 。因为盐效应会减弱残存硅羟基的干扰作用  ，可抑制峰形拖尾并改善分离效果 。但经常使用磷酸盐或卤化物  ，会造成硅烷化固定相的降解 。
通常调节pH值对中性化合物的影响不大  ，但对带有离子化基团的化合物（如氨基、羧基和羟基等）保留因子影响可达10～30倍  ，分离度变化明显 。但如果使用的流动相中加入了缓冲盐  ，最好在使用前用纯水过渡 。如果缓冲盐或离子对试剂浓度较低  ，需要较长时间平衡 。  
二、调节二手LC高效液相色谱仪流动相的溶剂极性强度：
1、由强到弱：
一般先用90%的乙腈或甲醇－水或缓冲溶液进行试验  ，可很快得到分离结果  ，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例 。
2、三倍规则：
每减少10%的有机溶剂（乙腈或甲醇）的量  ，保留因子增加约3倍  ，此为三倍规则 。调整时注意观察各个峰的分离情况 。
3、粗调转微调：
当分离达到一定程度时  ，应将有机溶剂（乙腈或甲醇）10%的改变量调整为5%  ，并据此规则逐渐降低调整率  ，直至各组分的分离情况不再改变 。