传统检测单糖、双糖的分析方法有化学法、光谱法、GCMS、HPLC等方法 。其中化学法无法准确测定单种糖的含量；光谱法的工作繁琐、误差比较大；GC-MS方法需要进行衍生化反应  ，前处理复杂  ，不利于快速分析；HPLC法虽然相比其他方法灵敏度好、检测速度快、适用范围广  ，但也存在检出限较低、抗干 扰能力差  ，尤其对于食品中低浓度的单糖、双糖很难进行精确的测定  ，无法满足现阶段对食品检测快速、灵敏、准确的要求 。LCMS/MS技术通过质谱的高选择性和高灵敏度能够降低目标物的检出限、提高检测的重现性 。
由于糖类为水溶性化合物  ，在常规的C18色谱柱上没有保留  ， 而采用其他填料的亲水色谱柱也很难得到太好的峰形或分离度 。 因此  ，选取一款合适的分析糖的色谱柱是液质分析糖的实验关键点 。目前专门测试糖的糖柱通常为液相柱  ，需要用到100%纯水相来作为流动相  ，并且流速通常高于1 mL/min  ，这样的色谱条件对于大多数的质谱离子源来说都无法实现化合物的有效离子化  ， 或者只有通过分流才能实现  ，但是分流后将损失仪器的检测灵敏度  ，失去了使用液质联用仪测试糖的提高灵敏度的目的 。

  二手AB SCIEX 的 LC-MS/MS液质联用系统的一大特点就是强大的TurboV离子源技术  ，离子源的加热能够达到750℃  ，ESI源耐受流速 范围 5 μL/min～3.0 mL/min  ，APCI源耐受流速范围50 μL/ min～3.0 mL/ min  ，因此可以直接使用HPLC糖柱在SCIEX液质联用仪上进行测试  ， 即实现了好的分离效果  ，又提高了检测灵敏度 。

实验使用二手 液质联用 SCIEX 质谱系统同时测定梨中的葡萄糖、果糖、蔗糖 和山梨醇四种糖, 实验方法简单、灵敏度高、选择性好 。
实验思路： 1. 配制果糖、葡萄糖、蔗糖和山梨醇标准曲线  ，测试四种水溶性 糖的低检出限；
                  2. 测试砀山酥梨果实中四种水溶性糖的含量  ，了解梨中四种糖的比例关系 。
样品处理 :  1.移取果糖、葡萄糖、蔗糖和山梨醇标准品  ，用纯水稀释  ，配制 成 50 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL、1 μg/mL、5 μg/mL 和 10 μg/mL 的标准溶液 。
                 2.梨果实中可溶性糖的提取 。
梨果实中糖的提取
材料：砀山酥梨（采集于南京农业大学江浦园艺实验站） 将样品去皮削成小块  ，液氮速冻后储存于-80冰箱 。称取2g样品  ，加液氮研磨后  ，加入80%乙醇7 mL混匀 。在37℃水浴中恒温 30 min  ，超声提取15 min  ，10000 r/min离心15 min 。将上清液移 入25 mL容量瓶 。重复提取3次  ，然后加入80%乙醇定容至25 mL 。取2 mL溶液旋转蒸发  ，用1 mL水溶解蒸干后的固体  ，溶解时用超 声波处理  ，尽量溶解完全 。溶液离心后  ，用0.22 μm水系滤膜处 理  ，即可用于测定 。实验过程中发现此前处理过程提取出的糖样品在液质仪器上 的响应信号过高  ，后样品又用纯水稀释10倍和1000倍分别上机测试 。
色谱方法色谱柱：Hi-Plex Ca, 300×7.7 mm； 流动相：100%纯水洗脱 流速：1 mL/min； 柱温：85℃； 进样量：10 μL 。