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QTRAP 5500 质谱系统MRM3定量技术对人血浆中依克那肽的测定方法

发布时间:2023-11-23       点击次数:1286

依克那肽(Exenatide)是一个个其中包含39个胺基酸残基的肽(原子量为4186.6 Da)  ,已被核准代替进行治疗1型和2型痛风 。该肽会改善胰腺组织细胞的匍萄糖依赖关系性胰岛素的产生  ,进而控制匍萄糖的产生 。在之前的3年里  ,血浆中依克那肽的降钙素原检测数据分析常见是用配体-根据法来完毕的 。列如  ,用药和动热学探究中  ,实用酶免疫抗体定性分析法律规定量依克那肽  ,但当产品中富含与待测物具有着近似于物理电学电学特点的干预物时  ,该具体方法有的时候有着确定性达不到的疑问 。QTRAP 5500 质谱程序MRM3降钙素原检测高技术可有保障人血浆中依克那肽判断的高决定性 。

测试方式方法:

土样调试:依克那肽从血浆中明确提出  ,生成液用N2挥干  ,复溶 。在大多数的分离纯化方法步骤中  ,溶剂的pH值和设计相盐浓度须精准性的掌握 。

液相色谱Shimadzu UFLC LC-20ACXR;反相液相色谱柱C-18 2.0×30 mm, 5μm;流动速度 0.6 ml/min;移动相A 为0.1% 甲酸水盐溶液;分子运动相B为0.1% 甲酸甲醇氢氧化钠溶液;等度冲洗掉  ,5min内  ,移动相B从2%增加到95%;进样量5μl 。

质谱:便用AB SCIEX QTRAP 5500质谱系统软件  ,MRM3扫描拍摄策略 。在MRM3扫描机中  ,阴离子阱填色用时没置为动向填色用时(DFT)  ,扫视的速度10000Da/Sec  ,阴阳离子阱提升准确时间为25ms,不同质谱检测间歇用时0.17s 。MRM3打印机扫描的一级化合物为838-396-202 。

方式方法形成:

在强化一级通过成绩质谱全扫描机(EMS)方式下  ,依克那肽生成带5个正正电荷的铝离子  ,m/z838.3  ,该化合物被选作母化合物 。该化合物在促进子化合物(EPI)打印模试下碎裂  ,呈现的最主要的子铁离子为m/z396.4 。该特级子阴铝离子在非线性阴铝离子阱中发生了碎裂  ,有MS3谱图   ,其大部分子铝离子为m/z202.2,据此三阳离子被用于构筑LC-MS MRM3按量方式 。

结局与谈话:

用到LC-MS MRM3介绍血浆取出物中的依克那肽能能严重地改善进行性 。依据给予的MRM3研究和传统文化MRM浅析所荣获色谱图的会比较  ,就可以查出  ,MRM3色谱图内基线较低  ,且没能MRM色谱图例的骚扰峰 。QTRAP 5500的扫苗高速度(10000Da/Sec)可以保障了有够的参数来领取亚铁离子色谱峰  ,为了因此降钙素原检测享有很好的重新性和合理度  。

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