二手HPLC液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来 。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决 。对于色谱柱和流动相的正确选择是二手高效液相色谱仪HPLC得到好的色谱图的关键 。
                              

（一）二手HPLC谱图峰拖尾的原因和解决方法 
1、筛板阻塞 ：反冲色谱柱  ，更换进口筛板  ，更换色谱柱 ；
2、色谱柱塌陷 ：填充色谱柱 ；
3、干扰峰 ：使用更长的色谱柱  ，改变流动相或更换色谱柱 ；
4、流动相PH选择错误 ：调整PH值 。对于碱性化合物  ，低PH值更有利于得到对称峰 ；
5、样品与填料表面的溶化点发生反应图 ：加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂  ，更改色谱柱 。

（二） 二手HPLC谱图 峰前延的原因和解决方法 
1、柱温低 ：升高柱温 ；
2、样品溶剂选择不恰当 ：使用流动相作为样品溶剂 ；
3、样品过载：降低样品含量 ；
4、色谱柱损坏：反冲色谱柱  ，填充色谱柱 。

（三） 二手HPLC谱图 峰分叉的原因和解决方法

1、呵护柱或介绍柱危害图 ：卸开呵护柱再开展介绍 。如何必备换洗呵护柱 。如何介绍柱无复流  ，卸开来洁净 。如何方面依旧会出现  ，可以是柱子被强抹去有机化合物危害   ，巧用适宜的净化办法 。如何方面依旧会出现  ，吃下可以被无复流  ，换洗筛板或换洗气相色谱柱 。

2、印刷品萃取剂不易溶于游动相 ：调整印刷品萃取剂  。若将运用游动相作印刷品萃取剂 。

（四） 二手HPLC谱图 峰变形的原因和解决方法 
样品过载 ：减少样品载量

（五） 二手HPLC谱图 早出的峰变形的原因和解决方法 
样品溶剂选择不恰当 ：减少进样体积  ，运用低极性样品溶剂 。

（六） 二手HPLC谱图 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰的原因和解决方法 
柱外效应：调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）  ，使用小体积的流通池 。

（七） 二手HPLC谱图 K’增加时  ，脱尾更严重的原因和解决方法 
1、二级保留效应  ，反相模式：加入三乙胺（或碱性样品）  ，加入乙酸（或酸性样品）  ，加入盐或缓冲剂（或离子化样品）  ，更换一支柱子 ；
2、二级保留效应  ，正相模式 ：加入三乙胺（或碱性样品）  ，加入乙酸（或酸性样品）  ，加入水（或多官能团化合物）  ，试用另一种方法 ；
3、二级保留效应  ，离子对：加入三乙胺（或碱性样品）  。

（八） 二手HPLC谱图 酸性或碱性化合物的峰拖尾的原因和解决方法 
缓冲不合适：使用浓度50-100mM的缓冲液  ，使用Pka等于流动相PH值的缓冲液  。

（九） 二手HPLC谱图 额外的峰的原因和解决方法 
1、样品中有其他组份：正常 ；
2、前一次进样的洗脱峰 ：增加运行时间或梯度斜率  ，提高流速；
3、空位或鬼峰：检查流动相是否纯净  ，使用流动相作为样品溶剂  ，减少进样体积 。

（十） 二手HPLC谱图 保留时间波动的原因和解决方法 
1、温控不当 ：调好柱温 ；
2、流动相组分变化 ：防止变化（蒸发、反应等） ；
3、色谱柱没有平衡 ：在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱 。

（十一） 二手HPLC谱图保留时间不断变化的原因和解决方法 

1、流速变化 ：重新设定流速 ；
2、泵中有气泡 ：从泵中除去气泡 ；
3、流动相选择不恰当 ：更换合适的流动相；选择合适的混合流动相 。